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嗜热菌在微生物采油中的应用

孙珊珊,张忠智,鲁莽

石油化工高等学校学报 2009, 22 (4): 41-44. DOI: 10.3696/j.issn.1006-396X.2009.04.011

摘要（998）

PDF （488KB）（450）

研究了3株嗜热菌(GW1,GW2,GW5)在微生物采油(MEOR)的应用价值。结果表明,3株菌的最适生长温度为55～65℃,最适生长pH值在7.0～8.0,最适生长含盐质量浓度在5000～20000mg/L。3株嗜热菌对两种油田药剂抗性的考察结果表明,磺酸盐助排剂和发泡剂对GW1的生长有抑制作用,发泡剂对GW2有抑制作用,磺酸盐助排剂对GW5有抑制作用。3种嗜热菌可以将原油中较重的组分降解为轻质组分,增加原油的流动性。经鉴定3株嗜热菌GW1,GW2和GW5均为Geobacillus属。

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绿色荧光蛋白标记在MEOR中的应用研究

张忠智,孙珊珊,王欲晓,罗一菁

石油化工高等学校学报 2009, 22 (4): 34-37. DOI: 10.3696/j.issn.1006-396X.2009.04.009

摘要（2250）

PDF （345KB）（480）

为了充分认识目的优势菌种经油藏运移后在产出水中分布的规律与数量,准确分析和客观评价MEOR现场试验效果,利用绿色荧光蛋白(GFP)基因标记目的菌,通过绿色荧光蛋白跟踪监测目的菌的动态信息。构建含有GFP基因的质粒pET-30a(+)-EGFP,并将其成功导入JD中。对构建的JD(gfp)工程菌进行培养发现,该工程菌在含有Kan质量浓度50μg/mL的培养条件下,重组质粒在JD(gfp)工程菌体内传代稳定,绿色荧光的表达稳定。但是在没有选择压力的培养条件下,重组质粒在JD工程菌胞体内有丢失现象。与野生菌混合培养,JD(gfp)工程菌具有很好的配伍性和竞争性,并且不发生重组质粒的水平转移,因此在环境中释放是安全的。

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提高原油采收率的耐热产多糖基因工程菌构建

伊文婧, 张忠智*,孙珊珊, 魏小芳, 罗一菁

石油化工高等学校学报 2007, 20 (4): 25-27.

摘要（263）

PDF （1051KB）（290）

为了提高用于微生物采油的掺水不溶性多糖的JD菌的耐温性能,将嗜热质粒pET-ecoRRF和pET
-tteRRF转化至菌株JD中,用卡纳霉素筛选转化子。在耐热性初步鉴定中,所构建的菌株可在45 ℃下生长;再进
行Western-blot检测确认,结果表明,RRF基因有高量的表达。RRF基因转化到JD菌中有较好的表达,提高了目
标菌株的耐热性能,耐热范围提高了5~8 ℃。由于Enterobactersp.和Escherichiacoli 的亲缘关系较近,所以将
Escherichiacoli 中的RRF基因在JD菌中表达效果比Thermusthermophilus 中的基因表达效果要好。最终将野生
JD菌改造成了一株能够在45℃耐热、产多糖的基因工程菌。